Médium MEM
Médium MEM (Minimum Essential Medium) je syntetické médium používané ke kultivaci buněčných kultur. Bylo vyvinuto Harry Eaglem v roce 1959[1]. Lze ho využít ke kultivaci širokého spektra savčích buněk včetně HeLa, BHK-21, HEK-293, HEP-2, HT-1080, MCF-7, fibroblastů a primárních krysích astrocytů.[2]. MEM je roztok takzvaných Earlových solí pojmenovaných po W. R. Earlovi, který definoval jejich složení [3], doplněný o esenciální aminokyseliny, glukosu a vitaminy. Jelikož MEM médium neobsahuje proteiny, lipidy ani růstové faktory, je často nutné doplnit MEM o fetální bovinní sérum.
Předchůdcem MEM bylo médium BME (Basal Medium Eagle) taktéž vyvinuto H. Eaglem v letech 1955-1957. Hlavním rozdílem bylo menší množství aminokyselin.[4]
V dnešní době existuje již několik modifikovaných MEM médií.
Složení
editovatNásledující tabulka obsahuje jednotlivé složky MEM a jejich koncentrace.[1]
| Složka | Koncentrace [mg/l] |
|---|---|
| L-Arginin | 105 |
| L-Cystein | 24 |
| L-Glutamin | 292 |
| L-Histidin | 31 |
| L-Isoleucin | 52 |
| L-Lysin | 58 |
| L-Methionin | 15 |
| L-Fenylalanin | 32 |
| L-Threonin | 48 |
| L-Tryptofan | 10 |
| L-Tyrosin | 36 |
| L-Valin | 46 |
| Glukosa | 1000 |
| NaCl | 6800 |
| KCl | 400 |
| CaCl2 | 200 |
| MgCl2·6H2O | 200 |
| NaH2PO4·2H2O | 150 |
| Cholin | 1 |
| Kyselina listová | 1 |
| Inositol | 2 |
| Nikotinamid | 1 |
| Pantotenát | 1 |
| Pyridoxal | 1 |
| Riboflavin | 0,1 |
| Thiamin | 1 |
Modifikovaná MEM media
editovatDMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium): Médium obsahující čtyřnásobek koncentrace vitaminů a aminokyselin oproti MEM. Poprvé použito R. Dulbeccem při studiu polyomavirů.[5]
MEM α: Oproti MEM navíc obsahuje i neesenciální aminokyseliny, kyselinu L-askorbovou, biotin, vitamin B12, lipoovou kyselinu, pyruvát sodný, nukleosidy a deoxynukleosidy.[6]
EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium): Mnozí prodejci uvádějí na trh i médium pod zkratkou EMEM, jedná se o MEM s přídavkem neesenciálních aminokyselin.[7]
Odkazy
editovatReference
editovat- ↑ a b EAGLE, Harry. Amino Acid Metabolism in Mammalian Cell Cultures. Science. 1959-08-21, roč. 130, čís. 3373, s. 432–437. Dostupné online [cit. 2023-03-09]. ISSN 0036-8075. DOI 10.1126/science.130.3373.432. (anglicky)
- ↑ https://www.thermofisher.com/cz/en/home/life-science/cell-culture/mammalian-cell-culture/cell-culture-media/mem.html
- ↑ EARLE, Wilton R.; SCHILLING, Edward L., et al. Production of Malignancy in Vitro. IV. The Mouse Fibroblast Cultures and Changes Seen in the Living Cells. JNCI: Journal of the National Cancer Institute. 1943-10. Dostupné online [cit. 2023-03-09]. ISSN 1460-2105. DOI 10.1093/jnci/4.2.165. (anglicky)
- ↑ EAGLE, Harry. Nutrition Needs of Mammalian Cells in Tissue Culture. Science. 1955-09-16, roč. 122, čís. 3168, s. 501–504. Dostupné online [cit. 2023-03-12]. ISSN 0036-8075. DOI 10.1126/science.122.3168.501. (anglicky)
- ↑ DULBECCO, R.; FREEMAN, G. Plaque production by the polyoma virus. Virology. 1959-07, roč. 8, čís. 3, s. 396–397. Dostupné online [cit. 2023-03-12]. DOI 10.1016/0042-6822(59)90043-1. (anglicky)
- ↑ STANNERS, C. P.; ELICEIRI, G. L.; GREEN, H. Two Types of Ribosome in Mouse–Hamster Hybrid Cells. Nature New Biology. 1971-03, roč. 230, čís. 10, s. 52–54. Dostupné online [cit. 2023-03-12]. ISSN 2058-1092. DOI 10.1038/newbio230052a0. (anglicky)
- ↑ Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) - 30-2003 | ATCC. www.atcc.org [online]. [cit. 2023-04-27]. Dostupné online.