Buněčná linie 3T3-L1

Buněčná linie 3T3-L1 je myší buněčná linie preadipocytů adherentního typu. Izolace této buněčné linie spočívala v klonování myších 3T3-L1 embryonálních fibroblastů, které ve velké míře akumulovaly lipidy ve formě tukových kapének ^[1]. Tato linie je vysoce využívaná ve studiu molekulární biologie.

Kultivace 3T3-L1

Myší embryonální fibroblasty 3T3-L1 se kultivují nejčastěji v Dulbecco´s Modified Eagle´s Medium (DMEM) obohaceném o 10 % fetálního bovinního séra (FBS) či 10 % telecího séra (CS) a přídavkem 4 mM glutaminu. Podmínky pro kultivaci zahrnují 5% atmosféru CO₂ a teplotu 37 ºC ^[2].

Diferenciace 3T3-L1 preadipocytů v adipocyty

Po dosažení konfluence je k buňkám přidán "růstový koktejl" skládající se z dexamethasonu, isobutylmethylxanthinu a insulinu. Tyto složky působí jako induktory adipogeneze neboli diferenciace preadipocytů v adipocyty ^[2]. Jeden z možných způsobů kvantifikace produkce TAG buňkami je obarvení konfluentních klonů barvivem Oil Red O, následně dané barvivo vyvázat 100% isopropanolem a měřit absorbanci při 500 nm ^[3].

Využití buněčné linie 3T3-L1

Využití buněčné linie 3T3-L1 preadipocytů je velice rozmanité. Pro jejich schopnost aktivace enzymů podílejících se na syntéze mastných kyselin a TAG se využívají k testování léků, které mají efekt na akumulaci tuků v buňkách. Využívají se též pro výzkum v oblasti působení oxidativního stresu ^[4], obesity ^[5], diabetu ^[6] a rakoviny ^[7].

Odkazy

Reference

↑ GREEN, Howard; KEHINDE, Olaniyi. Sublines of mouse 3T3 cells that accumulate lipid. Cell. 1974-03-01, roč. 1, čís. 3, s. 113–116. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 0092-8674. DOI 10.1016/0092-8674(74)90126-3. (English)
↑ ^a ^b ZEBISCH, Katja; VOIGT, Valerie; WABITSCH, Martin. Protocol for effective differentiation of 3T3-L1 cells to adipocytes. Analytical Biochemistry. 2012-06-01, roč. 425, čís. 1, s. 88–90. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 0003-2697. DOI 10.1016/j.ab.2012.03.005. (anglicky)
↑ BENCHAMANA, Ameena; MORI, Hiroyuki; MACDOUGALD, Ormond A. Regulation of adipocyte differentiation and metabolism by lansoprazole. Life Sciences. 2019-12, roč. 239, s. 116897. Dostupné online [cit. 2022-06-01]. DOI 10.1016/j.lfs.2019.116897. PMID 31644894. (anglicky)
↑ RUDICH, A; TIROSH, A; POTASHNIK, R. Prolonged oxidative stress impairs insulin-induced GLUT4 translocation in 3T3-L1 adipocytes.. Diabetes. 1998-10-01, roč. 47, čís. 10, s. 1562–1569. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 0012-1797. DOI 10.2337/diabetes.47.10.1562.
↑ Validate User. academic.oup.com [online]. [cit. 2022-05-15]. Dostupné online. DOI 10.3945/jn.108.100966.
↑ THOMSON, Michael J.; WILLIAMS, Martin G.; FROST, Susan C. Development of Insulin Resistance in 3T3-L1 Adipocytes *. Journal of Biological Chemistry. 1997-03-21, roč. 272, čís. 12, s. 7759–7764. PMID: 9065437. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 0021-9258. DOI 10.1074/jbc.272.12.7759. PMID 9065437. (English)
↑ HWANG, Sung-Hee; LEE, Michael. Autophagy inhibition in 3T3-L1 adipocytes breaks the crosstalk with tumor cells by suppression of adipokine production. Animal Cells and Systems. 2020-01-02, roč. 24, čís. 1, s. 17–25. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 1976-8354. DOI 10.1080/19768354.2019.1700159. PMID 32158612. (anglicky)

Externí odkazy

Obrázky, zvuky či videa k tématu Buněčná linie 3T3-L1 na Wikimedia Commons

[1] GREEN, Howard; KEHINDE, Olaniyi. Sublines of mouse 3T3 cells that accumulate lipid. Cell. 1974-03-01, roč. 1, čís. 3, s. 113–116. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 0092-8674. DOI 10.1016/0092-8674(74)90126-3. (English)

[#1-2] ZEBISCH, Katja; VOIGT, Valerie; WABITSCH, Martin. Protocol for effective differentiation of 3T3-L1 cells to adipocytes. Analytical Biochemistry. 2012-06-01, roč. 425, čís. 1, s. 88–90. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 0003-2697. DOI 10.1016/j.ab.2012.03.005. (anglicky)

[3] BENCHAMANA, Ameena; MORI, Hiroyuki; MACDOUGALD, Ormond A. Regulation of adipocyte differentiation and metabolism by lansoprazole. Life Sciences. 2019-12, roč. 239, s. 116897. Dostupné online [cit. 2022-06-01]. DOI 10.1016/j.lfs.2019.116897. PMID 31644894. (anglicky)

[4] RUDICH, A; TIROSH, A; POTASHNIK, R. Prolonged oxidative stress impairs insulin-induced GLUT4 translocation in 3T3-L1 adipocytes.. Diabetes. 1998-10-01, roč. 47, čís. 10, s. 1562–1569. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 0012-1797. DOI 10.2337/diabetes.47.10.1562.

[5] Validate User. academic.oup.com [online]. [cit. 2022-05-15]. Dostupné online. DOI 10.3945/jn.108.100966.

[6] THOMSON, Michael J.; WILLIAMS, Martin G.; FROST, Susan C. Development of Insulin Resistance in 3T3-L1 Adipocytes *. Journal of Biological Chemistry. 1997-03-21, roč. 272, čís. 12, s. 7759–7764. PMID: 9065437. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 0021-9258. DOI 10.1074/jbc.272.12.7759. PMID 9065437. (English)

[7] HWANG, Sung-Hee; LEE, Michael. Autophagy inhibition in 3T3-L1 adipocytes breaks the crosstalk with tumor cells by suppression of adipokine production. Animal Cells and Systems. 2020-01-02, roč. 24, čís. 1, s. 17–25. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 1976-8354. DOI 10.1080/19768354.2019.1700159. PMID 32158612. (anglicky)

[1]

[2]

[3]

[4]

[5]

[6]

[7]